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羅非魚無乳鏈球菌病流行情況疾病臨床癥狀診斷方法
發(fā)布時(shí)間：13/05/18羅非魚無乳鏈球菌病流行情況疾病臨床癥狀診斷方法
最近幾年全球范圍內(nèi)鏈球菌感染多種海水和淡水養(yǎng)殖魚類并引起暴發(fā)性疾病的報(bào)道呈現(xiàn)增加趨勢，尤其在亞洲的羅非魚養(yǎng)殖地區(qū)報(bào)道較多，無乳鏈球菌已給亞洲的羅非魚養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的危害。本文就羅非魚無乳鏈球菌病的流行情況、臨床癥狀、病原性特征、致病機(jī)理、診斷方法和防治措施作簡要介紹。
疾病流行情況
A、流行季節(jié)
本病在我國南方地區(qū)流行于春、夏和秋季，高峰為7-9月，流行水溫25-37℃，發(fā)病率達(dá)20-30%，發(fā)病魚的死亡率可高達(dá)60-100%。
B、危害對象
無乳鏈球菌病主要以水平方式傳播，體表有損傷或受環(huán)境應(yīng)激過大的魚易感染發(fā)病。2010年以前疾病主要威脅100g以上的稚魚到1kg左右的成魚，2011年苗種也大面積暴發(fā)鏈球菌病。
C、流行區(qū)域
我國海南、廣西、廣東和福建四大養(yǎng)殖區(qū)，2008年以前呈局部慢性發(fā)病，2009年7月大面積發(fā)病率高達(dá)40%，死亡率接近100%，造成的經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)7.02億人民幣。之后該病如期而至，且發(fā)病區(qū)域越來越廣，發(fā)病時(shí)間越來越早，嚴(yán)重影響了養(yǎng)殖戶養(yǎng)殖積極性，病害也給當(dāng)?shù)亓_非魚產(chǎn)業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
疾病臨床癥狀
A、活動情況
發(fā)病初期體色加深或發(fā)黑，游動緩慢，常在塘邊、水面無方向性地緩慢游動，有時(shí)身體屈曲，逐漸失去平衡，有的在水中翻滾，有的側(cè)身做圓圈運(yùn)動。病情嚴(yán)重時(shí)，臨死前病魚于水面打轉(zhuǎn)或間隙性竄游。
B、體表癥狀
部分病魚眼球突出及出血，單眼或雙眼角膜混濁發(fā)白，水晶體及玻璃體也混濁，甚至眼球脫落。下顎及兩腮蓋下緣有彌漫性出血，腹部體表具點(diǎn)狀或斑狀出血甚至潰瘍。
C、剖解癥狀
肝臟、膽囊、脾臟腫大，特別是在急性鏈球菌暴發(fā)的早期病魚內(nèi)臟。最明顯的癥狀是膽囊腫大，有的比正常的體積大數(shù)倍。嚴(yán)重時(shí)潰爛，腸道和胃積水或積黃色粘液。
在急性感染時(shí)，鏈球菌迅速達(dá)到血液并擴(kuò)散至全身各組織器官，出現(xiàn)內(nèi)臟的廣泛出血和肝、脾、腎、心、腦、眼和腸道的大面積出血，脾和腎臟腫大。
病原學(xué)特征
A、鏈球菌分類
暴發(fā)性羅非魚鏈球菌主要由無乳鏈球菌引發(fā)，往往伴有其它細(xì)菌病如愛德華氏菌、弧菌、嗜水氣單胞菌等的混合感染。
B、 鏈球菌理化特性。
無乳鏈球菌菌體為圓形或卵圓形，直徑約為2μm，鏈狀或成對排列，常呈成長鏈排列，無鞭毛，無芽孢，無運(yùn)動性。無乳鏈球菌為兼性厭氧菌。大多數(shù)無乳鏈球菌菌株最適溫度為36-37℃，最適pH值為7.4-7.6。
致病機(jī)理
A、散播機(jī)理
羅非魚是無乳鏈球菌高度敏感的宿主。病原菌如何通過黏膜和組織屏障而侵入血液循環(huán)，早期研究提示單核細(xì)胞攜帶細(xì)菌或通過其他機(jī)制進(jìn)行散播，如細(xì)胞噬菌作用。
B、毒力因子
鏈球菌對腦膜內(nèi)皮細(xì)胞的粘附作用以及細(xì)菌分泌出毒性因子作用于內(nèi)皮細(xì)胞可能對鏈球菌穿越血腦屏障有重要有作用。
疾病診斷方法
臨床癥斷
觀察發(fā)病魚是否具有如嗜睡打轉(zhuǎn)、眼球突出或渾濁發(fā)白、腦膜炎、內(nèi)臟器官及體表出血等典型病理變化。
病原檢測
采集發(fā)病魚的組織，制備組織觸片進(jìn)行基姆沙染色，也可進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，進(jìn)行革蘭氏染色，借助光學(xué)顯微鏡油鏡觀察是否存在成雙或成鏈狀的球性細(xì)菌。
分子快診技術(shù)
在無菌條件下，從發(fā)病魚的組織中是否分離到致病性鏈球菌，可采用生化方法、免疫學(xué)方法或分子生物學(xué)方法對分離細(xì)菌進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定來確診。
目前我們使用無乳鏈球菌具有高度保守性的莢膜多糖基因和CAMP因子基因?yàn)闄z測序列，成功建立了快速檢測羅非魚無乳鏈球菌的PCR方法，這個(gè)方法具有簡便、快速、靈敏、準(zhǔn)確和特異性等優(yōu)點(diǎn)。
疾病暴發(fā)原因分析
養(yǎng)殖環(huán)境差
養(yǎng)殖密度過高、水源受到畜禽糞尿的污染、長期投喂質(zhì)量比較差的人工配合飼料的池塘，往往發(fā)病率就比較高。
水溫變幅大
疾病發(fā)生大多在高溫季節(jié)，尤其是水溫變化幅度大時(shí)，鏈球菌病的暴發(fā)和高死亡率均比較高，因此疾病的發(fā)生與否與溫度的變化密切相關(guān)。一般而言，當(dāng)養(yǎng)殖水體溫度高，發(fā)病率與死亡率就均比較高，而當(dāng)溫度一旦下降，其發(fā)病率和死亡率就可能顯著下降。
魚體自身差異
鏈球菌病發(fā)病與魚體自身差異有一定的相關(guān)性，比如品種、體質(zhì)差異都會引起魚體感染疾病的易感性不同。
病原菌耐藥性增強(qiáng)
較差的水體、底質(zhì)環(huán)境為鏈球菌的生長和繁殖提供的適宜條件，加之現(xiàn)在抗生素藥物的濫用，使鏈球菌不斷變異，產(chǎn)生強(qiáng)耐藥性，同時(shí)對魚體肝臟解毒功能造成更大的負(fù)荷。
疾病防治措施
針對羅非魚無乳鏈球菌病的防治，動物保健研究所以“以防為主、快診早治、合理用藥”十二字方針為指導(dǎo)思想，歷經(jīng)三年實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)理論研究和生產(chǎn)試驗(yàn)，建立了一套“羅非魚鏈球菌病綜合防治技術(shù)”，該技術(shù)主要從易感動物羅非魚、傳播媒介水環(huán)境和病原菌無乳鏈球菌三方面入手，以快速診斷技術(shù)、獨(dú)家的水質(zhì)調(diào)節(jié)技術(shù)、免疫增強(qiáng)技術(shù)、特異性免疫、配方優(yōu)化和藥物防治等為技術(shù)手段。
綜合技術(shù)的應(yīng)用有效地降低了鏈球菌病的發(fā)病死亡率，由以往的死亡率30%以上減少到少發(fā)病甚至不發(fā)病，同時(shí)綜合技術(shù)的應(yīng)用提高了產(chǎn)量，使羅非魚養(yǎng)殖戶從連年虧損的打擊中重獲信心。
疾病流行情況
A、流行季節(jié)
本病在我國南方地區(qū)流行于春、夏和秋季，高峰為7-9月，流行水溫25-37℃，發(fā)病率達(dá)20-30%，發(fā)病魚的死亡率可高達(dá)60-100%。
B、危害對象
無乳鏈球菌病主要以水平方式傳播，體表有損傷或受環(huán)境應(yīng)激過大的魚易感染發(fā)病。2010年以前疾病主要威脅100g以上的稚魚到1kg左右的成魚，2011年苗種也大面積暴發(fā)鏈球菌病。
C、流行區(qū)域
我國海南、廣西、廣東和福建四大養(yǎng)殖區(qū)，2008年以前呈局部慢性發(fā)病，2009年7月大面積發(fā)病率高達(dá)40%，死亡率接近100%，造成的經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)7.02億人民幣。之后該病如期而至，且發(fā)病區(qū)域越來越廣，發(fā)病時(shí)間越來越早，嚴(yán)重影響了養(yǎng)殖戶養(yǎng)殖積極性，病害也給當(dāng)?shù)亓_非魚產(chǎn)業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
疾病臨床癥狀
A、活動情況
發(fā)病初期體色加深或發(fā)黑，游動緩慢，常在塘邊、水面無方向性地緩慢游動，有時(shí)身體屈曲，逐漸失去平衡，有的在水中翻滾，有的側(cè)身做圓圈運(yùn)動。病情嚴(yán)重時(shí)，臨死前病魚于水面打轉(zhuǎn)或間隙性竄游。
B、體表癥狀
部分病魚眼球突出及出血，單眼或雙眼角膜混濁發(fā)白，水晶體及玻璃體也混濁，甚至眼球脫落。下顎及兩腮蓋下緣有彌漫性出血，腹部體表具點(diǎn)狀或斑狀出血甚至潰瘍。
C、剖解癥狀
肝臟、膽囊、脾臟腫大，特別是在急性鏈球菌暴發(fā)的早期病魚內(nèi)臟。最明顯的癥狀是膽囊腫大，有的比正常的體積大數(shù)倍。嚴(yán)重時(shí)潰爛，腸道和胃積水或積黃色粘液。
在急性感染時(shí)，鏈球菌迅速達(dá)到血液并擴(kuò)散至全身各組織器官，出現(xiàn)內(nèi)臟的廣泛出血和肝、脾、腎、心、腦、眼和腸道的大面積出血，脾和腎臟腫大。
病原學(xué)特征
A、鏈球菌分類
暴發(fā)性羅非魚鏈球菌主要由無乳鏈球菌引發(fā)，往往伴有其它細(xì)菌病如愛德華氏菌、弧菌、嗜水氣單胞菌等的混合感染。
B、 鏈球菌理化特性。
無乳鏈球菌菌體為圓形或卵圓形，直徑約為2μm，鏈狀或成對排列，常呈成長鏈排列，無鞭毛，無芽孢，無運(yùn)動性。無乳鏈球菌為兼性厭氧菌。大多數(shù)無乳鏈球菌菌株最適溫度為36-37℃，最適pH值為7.4-7.6。
致病機(jī)理
A、散播機(jī)理
羅非魚是無乳鏈球菌高度敏感的宿主。病原菌如何通過黏膜和組織屏障而侵入血液循環(huán)，早期研究提示單核細(xì)胞攜帶細(xì)菌或通過其他機(jī)制進(jìn)行散播，如細(xì)胞噬菌作用。
B、毒力因子
鏈球菌對腦膜內(nèi)皮細(xì)胞的粘附作用以及細(xì)菌分泌出毒性因子作用于內(nèi)皮細(xì)胞可能對鏈球菌穿越血腦屏障有重要有作用。
疾病診斷方法
臨床癥斷
觀察發(fā)病魚是否具有如嗜睡打轉(zhuǎn)、眼球突出或渾濁發(fā)白、腦膜炎、內(nèi)臟器官及體表出血等典型病理變化。
病原檢測
采集發(fā)病魚的組織，制備組織觸片進(jìn)行基姆沙染色，也可進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，進(jìn)行革蘭氏染色，借助光學(xué)顯微鏡油鏡觀察是否存在成雙或成鏈狀的球性細(xì)菌。
分子快診技術(shù)
在無菌條件下，從發(fā)病魚的組織中是否分離到致病性鏈球菌，可采用生化方法、免疫學(xué)方法或分子生物學(xué)方法對分離細(xì)菌進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定來確診。
目前我們使用無乳鏈球菌具有高度保守性的莢膜多糖基因和CAMP因子基因?yàn)闄z測序列，成功建立了快速檢測羅非魚無乳鏈球菌的PCR方法，這個(gè)方法具有簡便、快速、靈敏、準(zhǔn)確和特異性等優(yōu)點(diǎn)。
疾病暴發(fā)原因分析
養(yǎng)殖環(huán)境差
養(yǎng)殖密度過高、水源受到畜禽糞尿的污染、長期投喂質(zhì)量比較差的人工配合飼料的池塘，往往發(fā)病率就比較高。
水溫變幅大
疾病發(fā)生大多在高溫季節(jié)，尤其是水溫變化幅度大時(shí)，鏈球菌病的暴發(fā)和高死亡率均比較高，因此疾病的發(fā)生與否與溫度的變化密切相關(guān)。一般而言，當(dāng)養(yǎng)殖水體溫度高，發(fā)病率與死亡率就均比較高，而當(dāng)溫度一旦下降，其發(fā)病率和死亡率就可能顯著下降。
魚體自身差異
鏈球菌病發(fā)病與魚體自身差異有一定的相關(guān)性，比如品種、體質(zhì)差異都會引起魚體感染疾病的易感性不同。
病原菌耐藥性增強(qiáng)
較差的水體、底質(zhì)環(huán)境為鏈球菌的生長和繁殖提供的適宜條件，加之現(xiàn)在抗生素藥物的濫用，使鏈球菌不斷變異，產(chǎn)生強(qiáng)耐藥性，同時(shí)對魚體肝臟解毒功能造成更大的負(fù)荷。
疾病防治措施
針對羅非魚無乳鏈球菌病的防治，動物保健研究所以“以防為主、快診早治、合理用藥”十二字方針為指導(dǎo)思想，歷經(jīng)三年實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)理論研究和生產(chǎn)試驗(yàn)，建立了一套“羅非魚鏈球菌病綜合防治技術(shù)”，該技術(shù)主要從易感動物羅非魚、傳播媒介水環(huán)境和病原菌無乳鏈球菌三方面入手，以快速診斷技術(shù)、獨(dú)家的水質(zhì)調(diào)節(jié)技術(shù)、免疫增強(qiáng)技術(shù)、特異性免疫、配方優(yōu)化和藥物防治等為技術(shù)手段。
綜合技術(shù)的應(yīng)用有效地降低了鏈球菌病的發(fā)病死亡率，由以往的死亡率30%以上減少到少發(fā)病甚至不發(fā)病，同時(shí)綜合技術(shù)的應(yīng)用提高了產(chǎn)量，使羅非魚養(yǎng)殖戶從連年虧損的打擊中重獲信心。